除了两位水管工兄弟，游戏中的经典角色也在电影中亮相。碧姬公主作为蘑菇王国意志坚定的统治者，在片中对马力欧进行了严酷的作战训练，以帮助后者挖掘自身潜力。喜剧演员杰克·布莱克、塞斯·罗根则为片中的大反派酷霸，以及“搞笑担当”大猩猩咚奇刚配音。值得一提的还有，为游戏中的马力欧和路易吉兄弟配音长达三十余年的查尔斯·马丁内斯，也在片中友情客串。

随着《超级马里奥兄弟大电影》的上映，更多有关马里奥系列角色的故事背景被公开，游戏粉丝们虽然玩了几十年的马里奥游戏，但是却第一次了解到意大利水管工竟然还有父母。另外，本片的导演还对蘑菇王国空中的砖块进行了解释。

当然最期待还是能早日看到王家卫所说的胡歌就是阿宝。

老爷子再次迎来了自己的大寿之日，但是，三个孩子没有一人到场。而且，老爷子谈起他们时，也不再直呼其名，而是称呼“老鼠”。

这次担任的女主谭松韵很受欢迎，她长了一张人畜无害的小圆脸，长相甜美，气质清纯可人，演绎角色非常有灵性是不少剧迷心目中的完美初恋女神，很适合演这样的角色。

很多网友对于贺刚的初印象，来自于《家，N次方》中外冷内热的富二代“薛洋”一角，实际上，自出道以来，贺刚挑战和演绎的角色跨度之大、题材之宽，早已不只局限在都市剧中类型角色驾轻就熟的演绎。年初参与《破晓东方》出演“陈云”一角，剧播期间，贺刚就收获了来自各方的赞誉，也让观众们再次关注到他的娴熟演技。而从古装探案悬疑电影《狄仁杰》三部曲中的狄仁杰，古装玄幻剧《华胥引》的《十三月》单元中的容浔，到电影《刿心剑》中的“伪君子”徐述，以及新版《倚天屠龙记》中用“躺平”演技征服观众的俞岱岩，贺刚与武侠推理题材的适配度也已然不言而喻。